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23966转染试剂polysciences公司现货
  • 发布日期:2019-03-08      浏览次数:191
    • 23966-2g的厂家2016年底已经停产,现在的规格是23966-1g

      Polyscience,Inc,成立于1961年,起家于化学但超越化学领域的美国制造商,总部位于宾夕法尼亚州沃灵顿,公司业务主要涵盖三大块:1.实验用产品:a)成千上万种具品牌特色的化合物和试剂,应用于实验室研究,组织学,电镜和解剖病理学以及其他诊断和生命科学研究;b)种类极其宽广的单体和聚合体,满足各方研究领域;c)有机/无机化合物,生物可降解材料,磁珠,荧光素,染料和特定抗体,以及常规蛋白包被颗粒(直径范围40nm~10mm)的全球首要制造工厂;d)顶端多聚化合物的供货中心,满足各种高性能工业领域需求,包括替代能源,汽车电子,国防&航空电子,便携式通信和计算机,医疗器械组装。2. 定制合成;3.cGMP生产服务。

      PEI转染手册

      转染操作流程:
       
        1、细胞传代:

      转染前24h内分离293T细胞至含10%胎牛血清的DMEM培养基 中进行传代培养,接种密度如下:
               6孔板:0.5x106细胞
               10cm培养皿:4.0x106细胞
               15cm培养皿:9.0x106细胞

      2、转染

      转染前将所有试剂置于室温。

      2.1质粒DNA的稀释

      在无菌试管中,用无血清的DMEM W / O酚红培养基(浓度为10%)稀释质粒DNA(ug)。病毒包装体(psPAX2):病毒包膜(pMD2G)和重组质粒DNA的稀释比例分别为4:2:1。
             

      6孔板:200ul+3ug的DNA
              10cm培养皿:1ml+7-8ug的DNA
              15cm培养皿:2ml+11-12ug的DNA

         2。2 转染复合体形成

      将PEI(1ug/uL)加入已稀释的总DNA中,PEI与DNA(ug)的混合比率为3:1。加入后立即涡旋混合。
            

       6孔板:9ul PEI复合体(1ug/ul)=9ug
              10cm培养皿:21ul PEI复合体(1ug/ul)=21ug
              15cm培养皿:33ul PEI复合体(1ug/ul)=33ug
      将添加到细胞的DNA/ PEI的混合物在室温下孵育15分钟。


      4、收获转染细胞

      转染后48小时内收获转染细胞/或病毒上清。
       
      试剂的配制:
      PEI(1ug/ul) Polysciences(CAT#23966-2配制成储液:)
      1、将无内毒素的无菌水加热至80℃左右溶解PEI,冷却到室温。
      2、调整pH值至7.0,用0.22um的滤器过滤消毒,分装后储存在-20℃。工作液可保持在4℃
       

      Polyethylenimine, Linear (MW 25,000) 23966-2为Polysciences公司生产的化合物产品,每批产品出厂前都经过严格的检测,保证每批产品都100%合格、稳定且高品质,但由于作为转染试剂使用过程中有很多实验室因素(PH,水纯度,称量的准度,dna纯度…)造成溶解出现问题或者转染效率出现差异,所以厂家只受理该产品纯度,分子量及重量缺失破损等相关投诉
       

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